มีแนวโน้มที่จะเกิดความล้มเหลวและแนวทางแก้ไขของ HPLC มากที่สุด

เนื่องจากเป็นเครื่องมือที่มีความแม่นยำสูง HPLC อาจทำให้เกิดปัญหาเล็กๆ น้อยๆ ได้อย่างง่ายดาย หากไม่ได้ใช้งานด้วยวิธีที่ถูกต้องระหว่างการใช้งานปัญหาที่พบบ่อยที่สุดประการหนึ่งคือปัญหาการบีบอัดคอลัมน์วิธีแก้ไขปัญหาโครมาโตกราฟีที่ผิดพลาดอย่างรวดเร็วระบบ HPLC ส่วนใหญ่ประกอบด้วยขวดอ่างเก็บน้ำ ปั๊ม หัวฉีด คอลัมน์ ห้องเก็บอุณหภูมิแบบคอลัมน์ เครื่องตรวจจับ และระบบประมวลผลข้อมูลสำหรับทั้งระบบ เสาหลัก ปั๊ม และเครื่องตรวจจับเป็นส่วนประกอบหลักและตำแหน่งหลักที่มีแนวโน้มที่จะเกิดปัญหา

กุญแจสำคัญในการกดดันคอลัมน์คือพื้นที่ที่ต้องให้ความสนใจเป็นพิเศษเมื่อใช้ HPLCความเสถียรของความดันคอลัมน์มีความสัมพันธ์อย่างใกล้ชิดกับรูปร่างพีคของโครมาโตกราฟี ประสิทธิภาพของคอลัมน์ ประสิทธิภาพการแยก และระยะเวลาในการกักเก็บความเสถียรของแรงดันคอลัมน์ไม่ได้หมายความว่าค่าความดันจะคงที่ที่ค่าคงที่ แต่ช่วงความผันผวนของความดันอยู่ระหว่าง 345kPa หรือ 50PSI (ทำให้สามารถใช้การชะล้างแบบไล่ระดับได้เมื่อความดันคอลัมน์คงที่และเปลี่ยนแปลงอย่างช้าๆ)แรงดันสูงหรือต่ำเกินไปเป็นปัญหาแรงดันคอลัมน์

มีแนวโน้มที่จะเกิดความล้มเหลวและแนวทางแก้ไขของ HPLC มากที่สุด

1 แรงดันสูงเป็นปัญหาที่พบบ่อยที่สุดในการใช้ HPLCนี่หมายถึงความกดดันที่เพิ่มขึ้นอย่างกะทันหันโดยทั่วไปมีสาเหตุดังต่อไปนี้: (1) โดยทั่วไป เกิดจากการอุดตันของช่องทางการไหลณ จุดนี้เราควรตรวจสอบทีละส่วนก.ขั้นแรก ให้ตัดทางเข้าของปั๊มสุญญากาศออกณ จุดนี้ หลอด PEEK ถูกเติมด้วยของเหลวเพื่อให้หลอด PEEK มีขนาดเล็กกว่าขวดตัวทำละลายเพื่อดูว่าของเหลวหยดตามต้องการหรือไม่หากของเหลวไม่หยดหรือหยดช้าๆ หัวกรองตัวทำละลายจะถูกบล็อกการรักษา: แช่ในกรดไนตริก 30% เป็นเวลาครึ่งชั่วโมงแล้วล้างออกด้วยน้ำบริสุทธิ์พิเศษหากของเหลวหยดแบบสุ่ม แสดงว่าหัวกรองตัวทำละลายเป็นปกติและอยู่ระหว่างการตรวจสอบข.เปิดวาล์วไล่อากาศเพื่อไม่ให้เฟสเคลื่อนที่ผ่านคอลัมน์ และหากความดันไม่ลดลงอย่างมีนัยสำคัญ หัวกรองสีขาวจะถูกบล็อกการรักษา: สิวหัวขาวที่กรองแล้วจะถูกเอาออกและโซนิคด้วยไอโซโพรพานอล 10% เป็นเวลาครึ่งชั่วโมงสมมติว่าความดันลดลงต่ำกว่า 100PSI หัวสีขาวที่กรองแล้วเป็นเรื่องปกติและอยู่ระหว่างการตรวจสอบค.ถอดปลายทางออกของคอลัมน์ออก หากความดันไม่ลดลง คอลัมน์จะถูกบล็อกการรักษา: หากเป็นบัฟเฟอร์เกลืออุดตัน ให้ล้าง 95% จนกระทั่งความดันเป็นปกติหากสิ่งกีดขวางเกิดจากวัสดุที่ได้รับการเก็บรักษาไว้อย่างดี ควรใช้กระแสที่แรงกว่าเฟสเคลื่อนที่ปัจจุบันเพื่อเร่งไปสู่แรงดันปกติหากความดันในการทำความสะอาดในระยะยาวไม่ลดลงตามวิธีการข้างต้น ในทางกลับกันทางเข้าและทางออกของคอลัมน์จะถือว่าเชื่อมต่อกับอุปกรณ์ในทางตรงกันข้าม และสามารถทำความสะอาดคอลัมน์ได้ด้วยเฟสเคลื่อนที่ในขณะนี้ หากความดันคอลัมน์ยังคงไม่ลดลง สามารถเปลี่ยนแผ่นตะแกรงทางเข้าคอลัมน์เท่านั้น แต่เมื่อการทำงานไม่ดี ก็ง่ายที่จะนำไปสู่การลดผลกระทบของคอลัมน์ ดังนั้นพยายามใช้ให้น้อยลงสำหรับปัญหาที่ยากลำบากอาจพิจารณาเปลี่ยนคอลัมน์

(2) การตั้งค่าอัตราการไหลไม่ถูกต้อง: สามารถรีเซ็ตอัตราการไหลที่ถูกต้องได้

(3) อัตราการไหลไม่ถูกต้อง: ดัชนีความหนืดของสัดส่วนการไหลที่แตกต่างกันจะแตกต่างกัน และความดันของระบบที่สอดคล้องกันของการไหลที่มีความหนืดสูงกว่าก็มีขนาดใหญ่เช่นกันหากเป็นไปได้ สามารถเปลี่ยนหรือตั้งค่าใหม่และเตรียมตัวทำละลายที่มีความหนืดต่ำได้

(4) ความดันของระบบเป็นศูนย์ดริฟท์: ปรับศูนย์ของเซ็นเซอร์ระดับของเหลว

2 ความดันต่ำเกินไป (1) มักเกิดจากการรั่วไหลของระบบสิ่งที่ต้องทำ: ค้นหาแต่ละการเชื่อมต่อ โดยเฉพาะอินเทอร์เฟซที่ปลายทั้งสองของคอลัมน์ และขันบริเวณที่รั่วให้แน่นถอดเสาออกแล้วขันให้แน่นหรือเรียงฟิล์ม PTFE ด้วยแรงที่เหมาะสม

(2) ก๊าซเข้าสู่ปั๊ม แต่ความดันมักจะไม่เสถียรในขณะนี้ทั้งสูงและต่ำที่สำคัญกว่านั้นปั๊มจะไม่สามารถดูดซับของเหลวได้วิธีการรักษา: เปิดวาล์วทำความสะอาดและทำความสะอาดด้วยอัตราการไหล 3~5 มล./นาทีถ้าไม่เช่นนั้น ฟองอากาศจะถูกดูดไปที่วาล์วไอเสียโดยใช้ท่อเข็มเฉพาะ

(3) ไม่มีการไหลออกของเฟสเคลื่อนที่: ตรวจสอบว่ามีเฟสเคลื่อนที่ในขวดอ่างเก็บน้ำหรือไม่ อ่างล้างจานแช่อยู่ในเฟสเคลื่อนที่หรือไม่ และปั๊มกำลังทำงานอยู่หรือไม่

(4) วาล์วอ้างอิงไม่ได้ปิด: วาล์วอ้างอิงจะปิดหลังจากการชะลอตัวปกติจะลงไปที่ 0.1~ 0.2 มล./ นาที หลังจากปิดวาล์วอ้างอิง

สรุป:

ในบทความนี้จะวิเคราะห์เฉพาะปัญหาทั่วไปในโครมาโตกราฟีของเหลวเท่านั้นแน่นอนว่าในการใช้งานจริงของเรา เราจะพบปัญหาอื่นๆ อีกมากมายในการจัดการข้อผิดพลาด เราควรปฏิบัติตามหลักการต่อไปนี้ เปลี่ยนเพียงครั้งละหนึ่งปัจจัยเท่านั้นเพื่อกำหนดความสัมพันธ์ระหว่างปัจจัยสมมุติกับปัญหาโดยทั่วไป เมื่อเปลี่ยนชิ้นส่วนเพื่อแก้ไขปัญหา เราควรใส่ใจกับการวางชิ้นส่วนที่รื้อแล้วกลับเข้าที่เพื่อป้องกันการสิ้นเปลืองการสร้างนิสัยบันทึกที่ดีคือกุญแจสู่ความสำเร็จในการจัดการกับข้อผิดพลาดโดยสรุป เมื่อใช้ HPLC สิ่งสำคัญคือต้องใส่ใจกับการปรับสภาพตัวอย่าง ตลอดจนการทำงานและการบำรุงรักษาอุปกรณ์อย่างเหมาะสม