ความเข้าใจเกี่ยวกับเปปไทด์กรดฟอสฟอริก

มันมีบทบาทสำคัญในกระบวนการชีวิต phosphorylating Tyrr, Ser, Thr ซึ่งตั้งอยู่บนเปปไทด์กรดอะมิโนฟอสโฟรีเลชั่นมักใช้ในการผลิตเปปไทด์กรดฟอสฟอริก ซึ่งปัจจุบันใช้ในกรดอะมิโนฟีนิลฟอสโฟรีเลตเดี่ยวกรดอะมิโน HBTU/ฟอสโฟรีเลชั่นมักใช้ในการเชื่อมต่อวิธี HOBt/DIEA ของกรดอะมิโนฟอสโฟรีเลชั่น แต่กรดฟอสฟอริกเปปไทด์กำลังเลือกข้อบกพร่องของแนวทางนี้ โดยเฉพาะอย่างยิ่งในเปปไทด์เปปไทด์ที่สร้างขึ้นนานกว่ามากหรือกรดอะมิโนฟอสเฟต การเชื่อมต่อประสิทธิภาพต่ำ ต่ำ ความบริสุทธิ์ของผลิตภัณฑ์ขั้นสุดท้ายสำหรับฟอสโฟเปปไทด์นี้ เราพิจารณาวิธีการหลังฟอสโฟรีเลชั่นแบบเลือกสรรกระบวนการสร้างคือการกำจัดกลุ่มป้องกันสายโซ่ด้านข้างของกรดอะมิโนแบบเลือกสรร ซึ่งจำเป็นต้องติดฉลากหลังจากการสังเคราะห์เปปไทด์สำหรับ Tyr นั้น Thr สามารถทำปฏิกิริยาได้โดยตรงโดยใช้กรดอะมิโนที่มีสายด้านข้างที่ไม่มีการป้องกัน-เซอร์ (trt) กำจัดออกในเชิงปริมาณที่สภาพแวดล้อม 1%TFA /DCM

ฟอสโฟรีเลชั่นด้วยฟอสฟอรัสฟอสฟอราไมด์เบนซีนคู่และไนโตรเจนสี่ตัวถูกสร้างขึ้นและตัวกลางที่ใช้งานฟอสฟอราไมด์ tetrazolium เชื่อมต่อกับไฮดรอกซีจากนั้นภายใต้การเกิดฟอสโฟรีลออกซิเดชันของกรดเปอร์ออกไซด์ปฏิกิริยาที่สมบูรณ์

ปัจจุบันวิธีการดัดแปลงเปปไทด์ฟอสโฟรีเลชั่นมีสองประเภทหลัก:

(1) การแนะนำโดยตรงของกรดอะมิโนฟอสโฟรีเลตที่มีการรับประกันปานกลางในลำดับโพลีเปปไทด์

(2) หลังจากเรซินที่สร้างขึ้นในลำดับเปปไทด์ ไปยัง Ser, Tyr หรือ Thr ฟอสโฟรีเลชั่นของไฮดรอกซิลสายโซ่ด้านข้าง

1) จะรับประกันว่ากรดอะมิโนฟอสโฟรีเลชั่นจะแนะนำลำดับเปปไทด์โดยตรง:

นั่นคือกรดอะมิโนที่จำเป็นต้องถูกฟอสโฟรีเลชั่นจะถูกฟอสโฟรีเลชั่นและป้องกันอย่างเหมาะสมล่วงหน้าโดยใช้ (Thr, Ser หรือ Tyr) จากนั้นฟอสโฟรีเลชั่นจะถูกจำกัดให้แคบลงจนถึงจุดเลือกของดัชนีโพลีเปปไทด์ตามกระบวนการสร้าง SPPS ปกติ .วิธีนี้ใช้งานง่าย ได้กลายเป็นวิธีการหลักในการปรับเปลี่ยนฟอสโฟรีเลชั่นขององค์กรเปปไทด์

2) หลังจากเรซินที่สร้างขึ้นบนลำดับเปปไทด์ ไปยังสายด้านข้าง Ser ไฮดรอกซี ฟอสโฟรีเลชัน, Tyr หรือ Thr:

การตกแต่งด้วยฟอสโฟรีเลชันโดยใช้ฟอสโฟรีเลชั่นของการหดตัวเพียงครั้งเดียวในวิธีโพลีเปปไทด์ เนื่องจากการขัดขวางแบบสเตอริกที่เกิดจากกลุ่มขนาดใหญ่ในการตกแต่งสายโซ่ด้านข้าง จึงเป็นเรื่องยากที่ฟอสโฟรีเลชั่นของกรดอะมิโนจะหดตัวด้วยสายโซ่เปปไทด์ในอนาคต การแนะนำกรดอะมิโนจะยากขึ้น โดยเฉพาะอย่างยิ่งในการตกแต่งที่มีไซต์ฟอสโฟรีเลชั่นหลายแห่ง การสร้างจะกลายเป็นเรื่องยากมาก องค์ประกอบของผลิตภัณฑ์ขั้นสุดท้ายมีความซับซ้อน แยกยาก และผลผลิตต่ำมาก

ดังนั้น เมื่อหลายตำแหน่งในสายโซ่เปปไทด์ถูกทำฟอสโฟรีเลท เราสามารถเลือกที่จะสร้างลำดับเปปไทด์บนเรซิน จากนั้นจึงทำฟอสโฟรีเลทโดยกลุ่มไฮดรอกซิลสายด้านข้างของ Ser, Tyr หรือ Thr: การสร้างของมันส่วนใหญ่เกี่ยวข้องกับการกำจัดแบบเลือกสรรของ กลุ่มป้องกันสายโซ่ด้านข้างที่ต้องการการรับรู้กรดอะมิโนหลังจากการสังเคราะห์เปปไทด์สำหรับ Tyr นั้น Thr สามารถใช้สายด้านข้างของกรดอะมิโนได้โดยตรงไม่ได้รับการปกป้องในการตอบสนอง

ฐานป้องกันโซ่ด้านข้าง 1% สภาพแวดล้อม TFA/DCM สามารถลบออกได้ในเชิงปริมาณเมื่อเลือกวิธีนี้ สามารถสร้างสารตัวกลางที่มีฤทธิ์ฟอสฟอรามิไดต์เตตราโซเลียมได้โดยใช้ไดเบนซิล ฟอสโฟรามิไดต์และเตตราโซเลียม ซึ่งเชื่อมโยงกับหมู่ไฮดรอกซิล จากนั้นออกซิไดซ์เพื่อสร้างกลุ่มฟอสโฟรีลในสภาพแวดล้อมเปอร์ออกซีแอซิดเพื่อทำให้ปฏิกิริยาสมบูรณ์